北京安必奇生物科技有限公司開發了一個基于CRISPR/Cas9的植物基因編輯平臺，該平臺可以幫助客戶培育具有優良性狀如高產、高營養、抗病蟲害或耐旱性等的植物。

CRISPR/Cas9基因編輯技術具有很高的效率和特異性，其原理與原核生物用于防御病毒或其他外來DNA入侵的機制相同。其中，CRISPR（clustered regularly interspaced short palindromic repeats）為成簇的具規律間隔的短回文重復序列。Cas9是一種RNA引導的與CRISPR相關的DNA內切酶。sgRNA （single-guide RNA）由crRNAs和tracrRNA組成，它可以與Cas9形成復合物，通過序列互補的方式把該復合物引導到目標DNA處。隨后Cas9的HNH和RuvC結構域在PAM （proospacer adjacent motifs）位點（通常為NGG）上游3bp處切割DNA，誘發DNA雙鏈斷裂（DNA double strand breaks，DBS）。DBS可通過非同源末端連接（non-homologous end joining，NHEJ）或同源重組修復（homology directed repair，HDR）的方式進行修復。非同源末端連接通常會造成片段的缺失或插入，而同源重組修復不僅可以實現片段的缺失或插入，還可實現精確的特異性位點突變。由于sgRNA的設計嚴格遵循沃森-克里克堿基配對原則，簡單但精準，因此CRISPR/Cas9已發展為一種非常有效、快捷的基因組編輯工具。

圖 1.CRISPR/Cas9基因編輯示意圖（僅顯示基因插入）。

北京安必奇生物擁有分子生物學實驗室和尖端的儀器。我們的細胞和分子生物學專家致力于為客戶提供sgRNA設計和載體構建定制服務。可以根據不同的DNA修復途徑提供單基因或多基因的敲除、插入、特異位點突變，甚至單核苷酸突變。公司可進行多種植物如擬南芥、水稻、小麥、苜蓿、玉米、棉花、高粱、大豆、甜菜、卷心菜、煙草、茄子、黃瓜、土豆、矮牽牛和油菜等的轉基因，能夠滿足客戶的各種需求。同時還擁有先進的CRISPR/Cpf1系統，可用于更高效、更特異的基因編輯。CRISPR/Cpf1系統具有以下幾個優點：

• 只需要crRNA而不需要tracrRNA即可成功靶向DNA。

• 可粘末端切割。

• 可通過在PAM位點下游18-23 bp處進行切割增加DNA重復切割機會。

• 可識別AT豐富的PAM位點。

實驗流程：

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