北京安必奇生物雙熒光素酶報告基因?qū)嶒炏到y(tǒng)采用熒火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶組成雙熒光素酶報告基因?qū)嶒炏到y(tǒng)。實驗中，報告基因（熒火蟲熒光素酶）活力的改變，與基因表達的特定實驗條件相關(guān)；而示蹤基因（海腎熒光素酶）作為內(nèi)對照，使測試不被實驗條件變化所干擾，減少內(nèi)在的變化因素所削弱的實驗準確性，如，培養(yǎng)細胞的數(shù)目和活力的差別，細胞轉(zhuǎn)染和裂解的效率等。熒火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶測試的組合，提供了雙遺傳報告基因應用的理想測試系統(tǒng)。
啟動子與轉(zhuǎn)錄因子相互作用檢測
轉(zhuǎn)錄因子是一種具有特殊結(jié)構(gòu)、行使調(diào)控基因表達功能的蛋白質(zhì)分子，也稱為反式作用因子。某些轉(zhuǎn)錄因子僅與其靶啟動子中的特異順序結(jié)合，這些特異性的序列被稱為順式因子。轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合域和順式因子實現(xiàn)相互結(jié)合，從而對基因的表達起抑制或增強的作用。熒光素酶報告基因?qū)嶒炇菣z測這類轉(zhuǎn)錄因子和其靶啟動子中的特異順序結(jié)合的重要手段。
技術(shù)流程
啟動子與轉(zhuǎn)錄因子相互作用檢測工作原理
應用領(lǐng)域
潛在啟動子/啟動子核心區(qū)域檢測；
潛在增強子/抑制子等調(diào)控子核心元件檢測；
啟動子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點檢測；
啟動子/增強子與轉(zhuǎn)錄因子的相互作用；
病毒/細胞相互作用；
藥物等化學誘導因素對啟動子活性的調(diào)節(jié)（抑制或增強）；
射線等物理誘導因素對啟動子活性的調(diào)節(jié)（抑制或增強）。
miRNA與3’UTR相互作用檢測
北京安必奇生物可提供含有熒光素酶報告基因的人、大鼠、小鼠的3' UTR靶標克隆，利用熒光素酶報告系統(tǒng)體外驗證miRNA潛在靶基因。miRNAs 與靶基因的3' UTR區(qū)域特異結(jié)合后調(diào)節(jié)靶基因的表達。當3' UTR靶標序列融合在一個熒光素酶報告基因下游并在體外表達時，miRNA通過與下游3' UTR特異結(jié)合從而調(diào)節(jié)熒光素酶的表達。通過分析熒光素酶的活性，間接了解miRNA的靶標調(diào)控作用和特異性。
參考文獻
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