

原位雜交技術(In situ hybridization,ISH)是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結合成核酸雜交分子,經檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)則是在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記的原位雜交方法,是利用熒光標記的DNA探針來檢測在細胞、組織和腫瘤的特定DNA序列的分子診斷技術。首先將樣本DNA變性,加入特定的熒光標記的探針與變性的樣本混合進行雜交,退火得到雙鏈DNA。探針信號能夠被熒光顯微鏡捕獲,從而定性、定量地檢測目標DNA。與其它用于研究染色體的技術不同,FISH操作靈活,不需要在正在分裂的細胞進行檢測,因而能夠用來檢測基因或染色體是否異常,通常用于遺傳咨詢,醫學和品種鑒定、DNA特定功能研究。利用FISH方法還可檢測非整倍體,微缺失綜合征以及基因重排等,這些指標對遺傳性疾病,如白血病,淋巴瘤,實體瘤,自閉癥等發育綜合征有重要的臨床意義。
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? 細胞染色體FISH(間期,中期和培養的細胞);
? 組織染色體FISH(福爾馬林固定的、石蠟包埋組織切片或細胞玻片);
? RNA-FISH(細胞內RNA定位,RNA加工,定量)。
? 探頭設計、標記及純化:利用技術,我們設計了具有靈敏度和特異性探針,并提供多種標記以供選擇。
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