CRlSPR/Cas9技術是基因編輯歷史上的又一里程碑。該技術通過gRNA指導Cas核酸酶對靶向基因進行特定DNA修飾。gRNA文庫是藥物篩選或靶向篩選特定通路的理想工具,gRNA文庫的建立將在功能基因篩選、疾病機制研究及藥物研發等方面發揮重要的功能。
安必奇生物可為客戶定制針對特定基因分類的。我們提供的gRNA文庫包括:全基因組文庫、 lncRNA 文庫、信號通路、細胞凋亡、細胞增殖、離子通道、核受體相關、各種疾病相關等文庫。除了可以提供Plasmid –gRNA Library以外,還可以根據客戶需要對gRNA文庫進行病毒包裝,以Packaged Viral -gRNA Library形式提交。我們選擇的基因靶點經過多個交互數據庫篩查,設計的gRNA均經過敲除效率驗證。我們會為您提供gRNA文庫構建服務,交付給您轉染級別的文庫,可直接用于高通量藥物靶點以及功能基因的篩選。
全基因組gRNA文庫的構建
安必奇生物的全基因組gRNA文庫的構建可以針對多種類型的基因組DNA,包括ORF cDNA,lncRNA cDNA以及特定區域的cDNA片段等。能夠針對全長cDNA乃至基因組DNA構建gRNA文庫,適用于高通量功能基因及相關藥物靶點篩選。
客戶定制gRNA文庫
安必奇生物提供的自定義文庫有:各種信號通路相關基因的gRNA文庫以及疾病相關基因的gRNA文庫。根據客戶確定的研究通路或疾病,篩選相關的靶基因。我們為客戶分別設計這些靶基因的gRNA序列并構建gRNA library。
技術流程
客戶提供靶基因/靶序列信息;
我們進行gRNA文庫構建,抽樣測序驗證;
根據客戶要求,構建gRNA表達質粒文庫,以Plasmid –gRNA Library形式提交;
根據客戶需要,對gRNA文庫進行病毒包裝,以Packaged Viral -gRNA Library形式提交;
將其連同抽樣報告、產品說明書一起寄送到客戶手中。
我們的優勢
gRNA自主設計及載體構建技術,具有更高效率、更低成本優勢;
結合慢病毒包裝系統,可用與各種難轉染的細胞,如原代細胞或神經元細胞等;
流式細胞、免疫熒光等多種分選方法,便于后期細胞篩選。
為客戶提供從gRNA文庫設計、合成、載體構建、慢病毒包裝到細胞分選的整體服務。
應用領域
用于通路或疾病相關基因的篩選[1];
高通量功能基因篩選[2];
藥物靶點篩選[3]。
參考文獻
[1] Noorani I. 140 Genome-wide CRISPR/cas9 Knockout Screens in Human Glioblastoma Identify Genetic Vulnerabilities[J]. Neurosurgery, 2016, 63: 157.
[2] Zhu S, Li W, Liu J, et al. Genome-scale deletion screening of human long non-coding RNAs using a paired-guide RNA CRISPR-Cas9 library[J]. Nature Biotechnology, 2016.
[3] Shalem O, Sanjana N E, Hartenian E, et al. Genome-scale CRISPR-Cas9 knockout screening in human cells[J]. Science, 2014, 343(6166): 84-87.
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