免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation，Co-IP）技術是以抗體和抗原之間的作用為基礎的，用于研究蛋白質相互作用的方法。原理是以細胞內源性靶蛋白為誘餌，將靶蛋白抗體與細胞總蛋白進行共孵育，促進免疫復合物的形成。隨后加入能夠與靶蛋白抗體結合的protein A/G，形成“結合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗體”復合物。免疫復合物經純化后進行凝膠電泳分離，結合Western blot 或質譜技術，進而達到純化目的蛋白質、定性檢測抗原或抗體的目的。與其它研究方法相比，免疫共沉淀在生理條件下檢測蛋白質之間的相互作用，因此，不僅可以檢測到體內形成的復合體，而且可排除過表達靶蛋白所帶來的假陽性。其次內源性的靶蛋白質是加工、修飾和成熟的蛋白質，因此，依賴于修飾的蛋白質相互作用也能被檢測到。

免疫共沉淀原理圖
服務內容
?  標簽蛋白的免疫共沉淀 (Myc-tag, Flag-tag, HA-tag)
?  非標簽蛋白的免疫共沉淀 (Native protein)
?  染色質免疫共沉淀（Chip-IP）
技術流程
?  構建相關真核表達載體，轉染細胞并獲得表達；
?  蛋白質抽提與定量；
?  免疫沉淀（以normal IgG作為對照）；
?  免疫沉淀產物SDS-PAGE和western blot分析；
?  技術服務實驗報告提交。
客戶需準備的材料
?  組織、細胞、蛋白質溶液等樣品，待測蛋白的相關信息等；
?  如需構建基因的過表達載體，則還需提供過表達載體及其相關信息；
?  其他與免疫沉淀相關信息。
實驗報告內容
?  免疫沉淀產物，電子圖片及分析結果；
?  蛋白質鑒定結果，SDS-PAGE及western blot分析結果；
?  實驗步驟、使用儀器等。

核酸與蛋白互作研究訂單表

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