背景介紹
哺乳動物細胞表達系統能夠為重組人源蛋白提供較接近于天然狀態的翻譯后修飾,能在蛋白表達過程中會形成接近天然蛋白的蛋白質折疊和聚合,具備活性蛋白所必須的空間結構和修飾。由哺乳動物細胞翻譯后再加工修飾產生的外源蛋白質,在活性方面高于原核表達系統及酵母、昆蟲細胞等真核表達系統,更接近于天然蛋白質。這一特性使得哺乳動物細胞表達系統在重組蛋白藥物,特別是治療性重組單抗藥物的研發和生產中的應用。安必奇建立了成熟的哺乳動物蛋白表達系統及純化服務平臺,提供哺乳動物蛋白表達系統的表達與純化服務。
安必奇擁有專業的哺乳動物細胞蛋白表達技術團隊,擁有豐富的CHO及HEK293細胞表達經驗,提供多種類型的哺乳動物細胞蛋白表達,包括瞬時轉染,穩定細胞系的構建等,針對不同的蛋白和項目需求,選擇適合的方案進行實驗,同時我們也會提供多種可選附加服務如:標簽去除,內毒素去除,HPLC檢測,無血清懸浮培養等,為客戶提供專屬的定制服務。
服務優勢
表達水平:我們的載體可在哺乳動物細胞中實現重組蛋白的高表達。
可選擇的多種表達系統:瞬時表達、穩定細胞株表達、營養缺陷型細胞株表達(DHFR/GS)、大規模懸浮細胞表達等。
生產規模:在優化后,我們的無血清懸浮細胞培養(HEK293和CHO)在一個月內可產生數克級蛋白。
成功率:已經成功表達多個蛋白。
服務內容和流程
| 實驗流程 | 實驗內容 | 交付結果 | 周期 |
| 密碼子優化+基因合成 | 我們會根據CHO或者HEK293密碼子的偏好性對目的序列進行密碼子優化,并且針對于特定功能的motif、重復序列、GC含量以及mRNA的二級結構等綜合考慮優化。 | 優化序列 | 4-8周 |
| 載體構建 | 安必奇擁有自主研發的表達載體,并且會在目的蛋白上添加分泌信號肽或標簽,以促進目的蛋白的分泌表達易于純化。 | 載體圖譜 | |
| 哺乳動物細胞轉染 | 我們采取瞬時轉染表達的方法,短時間生產少量蛋白。同時我們也有構建穩定細胞系平臺,使之長期穩定生產,瞬時轉染一般在2-3周內可以表達少量的蛋白。 | ||
| 穩定轉染細胞篩選 | 穩定轉染需要長時間的進行篩選,獲得細胞株,穩定高表達目的蛋白,適用于大規模生產蛋白。 | ||
| 重組蛋白表達評估 | 小量表達目的蛋白,對蛋白的表達量及蛋白性質進行評估 | 優化結果 | |
| 蛋白純化 | 安必奇生物擁有先進的AKTA purifier系統和全套預裝的離子柱、分子篩、疏水柱及親和層析柱,會根據不同的項目選擇適合的純化方法 | 目的蛋白 | |
| 目的蛋白質檢 | 利用定性或者定量分析的方法進行蛋白質鑒定 | 檢測結果 | |
| 最終交付 | 根據客戶需求,提供蛋白凍干等服務 | 目的蛋白及實驗報告 |






