與其他公司采用雜交瘤技術生產兔單克隆抗體的技術不同,安必奇生物基于公司的噬菌體展示技術平臺,構建了兔單克隆抗體研發平臺,可以為客戶提供兔單克隆抗體制備服務。

兔抗體庫是兔源多克隆抗體和單克隆抗體的來源,產生的抗體擁有特異性、活性和親和力的優點。因為兔和嚙齒類動物中常用的大鼠、小鼠進化關系較遠,嚙齒類單克隆抗體(以及從轉入了人體免疫球蛋白基因的轉基因小鼠中制備的人單克隆抗體)對嚙齒類和人體抗原共同的抗原決定簇不起作用,而兔抗體卻往往可以辨識嚙齒類和人體抗原共同抗原決定簇,克服了抗體生產中這一障礙。噬菌體展示技術對表形(蛋白質)和基因型(cDNA)同時進行篩選,因而由此法制備的兔單克隆抗體具有優勢。此外,和兔雜交瘤技術相比,我們公司的噬菌體展示平臺可以同時生產更多數量的單克隆抗體。
噬菌體展示系統是在大腸桿菌中實現的,而兔Fab抗體片段對大腸桿菌卻是有毒性的。通常有兩種方法可以避免兔Fab抗體片段在細菌細胞中表達的毒性、不溶性以及表達量低的問題。一是鏈接兔源抗體可變區(Vλ, Vk, and VH) 和人源抗體恒定區(Ck and CH1),以此來制造兔人嵌合Fab抗體庫。Carlos F. Barbas III 和 Christoph Rader博士的研究證明這種方法是有效的。另一種方法是利用酵母展示技術在酵母Pichia pastoris中表達特定的兔源Fab(或scFv)抗體,我們公司目前并不使用這種方法。
值得注意的是,小鼠以及人的k 輕鏈都具有兩個鏈內二硫鍵,而大多數兔源抗體除此之外還有另一個連接可變區和恒定區的二硫鍵。科學家在研究這條多出來的二硫鍵在兔/人嵌合Fab庫的建造和篩選中的作用時發現,具有bas突變以及野生親本b9這兩個異型都是制備兔源單克隆抗體的來源。
安必奇生物已經為客戶構建了多個兔免疫抗體庫,并為我們的客戶提供特性抗原的抗體篩選服務。值得指出的是, PCR引物合成中以及PCR反應中的錯誤造成的片段缺失或移碼錯誤,是抗體庫構建過程中一大困擾,而我司的結構內選擇技術有效的解決了這一問題。





