大鼠單克隆抗體簡介:
大鼠單克隆抗體系使用大鼠進行免疫,并將其激活的B細胞與瘤細胞融合進而篩選陽性單克隆來制備的高特異性抗體,具有如下優點:
· 單克隆抗體的一般優點
· 檢測小鼠來源的抗原一般不會產生背景交叉反應
· 解決針對小鼠蛋白的抗體難以在小鼠自身中產生的問題
安必奇的優勢:
雖然大鼠單克隆抗體有上述適用情況和優勢,但由于之前大鼠實驗體系中沒有成熟的腫瘤細胞系用于融合,因而使得制備大鼠單克隆抗體的難度和成本都增加。為了解決這個問題,安必奇的技術人員優化了大鼠的骨髓瘤細胞。
我們的大鼠單克隆抗體:
· pM級的親和性和異性
· 對多種抗原均有效果
· 可以識別區分轉錄后修飾(PTM)
· 可同時識別人類蛋白及其小鼠同源蛋白(要求序列同源性高)
· 適用于甲醛固定的免疫組化
· 可制備具有生物活性的抗體
服務具體內容:
可使用小分子、多肽、修飾多肽、蛋白、融合蛋白、修飾蛋白等作為抗原進行單克隆抗體制備。同時,我們也提供抗原制備服務,包括DNA合成、質粒構建、蛋白表達、蛋白純化、蛋白修飾、多肽合成、多肽修飾、多肽與載體蛋白交聯、小分子結構分析及與載體蛋白交聯等。如客戶需要,我們還提供抗體提純及抗體鑒定服務。
(所涉及轉錄后修飾一般包括:磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化修飾等)
具體制備大鼠單克隆抗體流程如下:
| 步驟 | 服務內容 | 周期 |
| 1.免疫動物 | 1. 免疫大鼠3-5只; 2. ELISA檢測血清滴度。 | 8-11周 |
| 2.雜交瘤制備 | 1. 細胞融合制備雜交瘤; 2. ELISA篩選細胞株。 | 3周 |
| 3.項目中樣品反饋(可選) | 1. 將ELISA陽性細胞上清寄給客戶檢測; 2. 客戶檢測并選擇所需細胞株。 說明:由于未亞克隆的細胞進行培養易丟失陽性細胞株,故要求客戶在收到上清后的10日內返回挑選結果。 | 2-4周 |
| 4.亞克隆 | 1. 將客戶選擇的所有陽性細胞株亞克隆; 2. 將亞克隆成功的陽性細胞株擴大培養,每個細胞株凍存兩管備用; 3. 抗體亞型鑒定; 若獲得多于3株細胞,且客戶要求交付額外的細胞,則在套餐外另計費。 客戶亦可選擇不進行亞克隆,而直接擴大培養。 | 2-6周 |
| 5.抗體純化(可選) | 從細胞上清液用蛋白A或蛋白G純化IgG抗體; 或可選擇在裸鼠或SCID小鼠中進行腹水培養并純化。 | 2-4周 |
| 6.抗體配對(可選) | 1.若干株陽性單抗兩兩組合,進行夾心ELISA實驗; 2.根據夾心ELISA實驗結果挑選配對抗體; 3.出具相關的檢測報告提供給客戶。 | 2-4周 |
| 7.功能驗證(可選) | 可以根據客戶對抗體的要求進行ELISA、WB等實驗的檢驗驗證,確定制備獲得的抗體是否可用于該實驗。 | 1-3周 |
| 8.保證型服務(可選) | 重復前述實驗(雜交瘤制備,抗體純化和檢測實驗;如有必要則重復動物免疫實驗)直至獲得符合要求的抗血清或純化抗體。 | NA |
動物在SPF條件下飼養
使用進口耗材和試劑(Corning,Gibco,HyClone或具有同等質量的品牌)
您將收獲:
實驗報告和鑒定/驗證報告
陽性雜交瘤上清(用于客戶鑒定和挑選)
3株陽性細胞株亞克隆(或選擇直接陽性克隆擴大培養)
異性與親和性的大鼠源單克隆抗體





