蛋白質印記(western blot)又稱免疫印跡(immunoblotting),是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色,并且通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的信息。由于western blot具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術,常用于鑒定蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。
技術路線
技術優勢
高分辨率的電泳技術:聚丙烯酰胺凝膠(polyacrylamide gel,PAGE)把分子篩作用和電荷效應結合在同一方法中,達到更高的靈敏度。
特異敏感的抗原-抗體反應:抗原抗體的結合實質上是抗原表位與抗體超變區中抗原結合點之間的結合。由于兩者在化學結構和空間構型上呈互補關系,所以抗原與抗體的結合具有高度的特異性。
1-5ng中等大小的靶蛋白:可檢測到低至1~5ng(可到10~100pg)中等大小的靶蛋白。





